เหตุใดการควบคุมคุณภาพผลิตภัณฑ์ CAR-T จึงต้องใช้เครื่องกําจัดกรดนิวคลีอิก

การป้องกันที่สําคัญในการผลิตเซลล์บําบัดขั้นสูง

หนึ่งในการพัฒนาที่สําคัญในการรักษามะเร็งคือการแนะนําการบําบัดด้วย Chimeric Antigen Receptor T-cell (CAR-T) เช่นเดียวกับ "ยาที่มีชีวิต" อื่นๆ คุณภาพและความปลอดภัยของผลิตภัณฑ์ CAR-T จําเป็นต้องมีการทดสอบอย่างเข้มข้น อย่างไรก็ตาม จากภัยคุกคามมากมายที่โรงงานผลิต CAR-T มีความเสี่ยง บางภัยคุกคามก็ตรวจไม่พบ และหนึ่งในภัยคุกคามที่สําคัญที่สุดคือการปนเปื้อนของกรดนิวคลีอิกในสิ่งแวดล้อม บทความนี้กล่าวถึงเหตุผลเบื้องหลังความจําเป็นของ Nucleic Acid Scavenger สําหรับการควบคุมคุณภาพผลิตภัณฑ์ CAR-T

[การระบุและวิเคราะห์การรวมตัวของไมโครพลาสติกในเซลล์ CAR-T - ScienceDirect]

ภัยคุกคามที่มองไม่เห็น: สารปนเปื้อนต่อสิ่งแวดล้อมในการผลิต CAR-T

การผลิตเซลล์ CAR-T เป็นกระบวนการหลายขั้นตอนที่ซับซ้อน รวมถึงการเก็บเลือดของผู้ป่วย การแยก T-cell ของผู้ป่วย การถ่ายโอนไวรัสไปยัง T-cell ของผู้ป่วย การขยายตัวของ T-cell ของผู้ป่วย และสูตรสุดท้ายของ T-cells ในแต่ละขั้นตอน ซึ่งอาจใช้เวลาหลายสัปดาห์จึงจะเสร็จสมบูรณ์ ผลิตภัณฑ์เซลล์ CAR-T มีความเสี่ยงต่อการปนเปื้อนในสิ่งแวดล้อมโดยรอบ

แม้ว่าจะมีข้อกําหนดด้านกฎระเบียบบางประการ แต่ก็มุ่งเน้นไปที่สารปนเปื้อนทางชีวภาพอื่นๆ เป็นหลัก:

•องค์การอาหารและยากําหนดให้มีการทดสอบผลิตภัณฑ์เซลล์ CAR-T เพื่อความเป็นหมันเอนโดท็อกซินและไมโคพลาสมา

•ต้องควบคุมหมายเลขสําเนาเวกเตอร์ (VCN) ให้สูงสุด 1-5 สําเนาต่อเซลล์

•ข้อกําหนดด้านความบริสุทธิ์ระบุเปอร์เซ็นต์ที่แน่นอนของเซลล์ CD3 ที่แสดง CAR

เมื่อเทียบกับข้อกําหนดการทดสอบอื่นๆ เหล่านี้ การปนเปื้อนในสิ่งแวดล้อมของ DNA และ RNA จะได้รับความสนใจมากกว่า การเปิดเผยสารสิ่งแวดล้อมที่เป็นอันตราย เช่น RNA และ DNA ทําให้ความปลอดภัยและคุณภาพของผลิตภัณฑ์ลดลง

การศึกษาล่าสุด: ไมโครพลาสติกในผลิตภัณฑ์ CAR-T (2024)

การศึกษาใน Journal of Hazardous Material โดย Mahati S et al. อภิปรายว่าการบําบัดด้วยเซลล์ CAR-T มีไมโครพลาสติกในปริมาณที่มีปัญหา

การศึกษานี้ยังนําไปสู่สิ่งอื่น ๆ เช่น:

1. ไมโครพลาสติกยังไม่ได้รับการกล่าวถึงเกี่ยวกับการผลิตเซลล์ CAR-T

2. ไมโครพลาสติกแทบไม่ก่อให้เกิดกิจกรรมของเซลล์ CAR-T ตามการศึกษาโฟลว์ไซโตเมทรี ELISA และความเป็นพิษต่อเซลล์

3. ไมโครพลาสติกทําให้เกิดการตายของเซลล์ ferroptosis และความอ่อนเพลียของ T-cells

4. เส้นทางการส่งสัญญาณ mTOR ถูกกระตุ้นมากเกินไป

การวิจัยสรุปผลทางคลินิกดังต่อไปนี้:

1. เซลล์ CAR-T ที่สัมผัสกับไมโครพลาสติกมีความสามารถในการระบุและทําลายเซลล์มะเร็งได้น้อยกว่า

2. ความอ่อนเพลียของ T-cell ที่เกิดจากไมโครพลาสติกช่วยลดความต้านทานพื้นฐานของเซลล์ CAR-T ในผู้ป่วย

การปนเปื้อนไมโครพลาสติกในระดับนี้อาจทําให้การรักษาไม่ได้ผล

การวิจัยแนวนี้มุ่งเน้นไปที่ผลกระทบของไมโครพลาสติก และการค้นพบการปนเปื้อนของไมโครพลาสติกและกรดนิวคลีอิกในสิ่งแวดล้อมในการผลิตนั้นแยกออกจากกันไม่ได้ และอยู่ในสภาพแวดล้อมการผลิตและวัสดุสิ้นเปลืองแบบแยกส่วนเดียวกัน

กรอบการกํากับดูแลระหว่างประเทศ: มาตรฐาน GMP สําหรับการปนเปื้อน

PIC/S และหน่วยงานกํากับดูแลทั่วโลกได้กําหนดความคาดหวังที่ชัดเจนเกี่ยวกับการปนเปื้อนในการผลิต CAR-T

นี่คือสิ่งที่การวิเคราะห์ปี 2026 อ้างถึงในวรรณกรรมการจัดการคุณภาพ:

• ผลิตภัณฑ์ CAR-T ไม่สามารถฆ่าเชื้อในขั้นสุดท้ายหรือผ่านการฆ่าเชื้อด้วยตัวกรองได้ ดังนั้นการป้องกันการปนเปื้อนจึงเป็นแนวป้องกันเดียวที่เหลืออยู่

• กลยุทธ์การควบคุมการปนเปื้อน (CCS) ต้องรวมถึงบุคลากร อุปกรณ์/ส่วนประกอบ สภาพแวดล้อมของสิ่งอํานวยความสะดวก วัสดุ กระบวนการ และการตรวจจับ/ป้องกัน

•ในการควบคุมการปนเปื้อนของกรดนิวคลีอิกข้อควรพิจารณาเป็นพิเศษ ได้แก่ :

•ความสามารถของโปรแกรมตรวจสอบสิ่งแวดล้อมในการตรวจจับสารตกค้างของกรดนิวคลีอิก

• พื้นที่การผลิตเฉพาะเพื่อป้องกันการปนเปื้อนข้ามของผลิตภัณฑ์ผู้ป่วยที่แตกต่างกัน

• ขั้นตอนการทําความสะอาดต้องได้รับการตรวจสอบเพื่อแสดงให้เห็นถึงการกําจัดการปนเปื้อนของ DNA/RNA

• ช่องว่างด้านกฎระเบียบ: ข้อบังคับปัจจุบันระบุว่า "การฆ่าเชื้อ" และ "การตรวจสอบความถูกต้องของการทําความสะอาด" แต่มีข้อกําหนดเพียงเล็กน้อยหรือไม่มีเลยในการแสดงให้เห็นถึงการกําจัดกรดนิวคลีอิก ดังนั้นผู้ผลิตจึงยังคงเสี่ยงต่อการปนเปื้อนข้ามและการตรวจจับกรดนิวคลีอิกที่เป็นบวกเท็จ

การปนเปื้อนของกรดนิวคลีอิกในสิ่งแวดล้อมส่งผลกระทบต่อการควบคุมคุณภาพ CAR-T

ชิ้นส่วน DNA และ RNA ของสิ่งแวดล้อมสร้างปัญหาหลักสองประการ:

1. ผลลัพธ์ที่ไม่ถูกต้องในการทดสอบการควบคุมคุณภาพ

พลาสมิด DNA หรือเวกเตอร์ไวรัสอาจยังคงอยู่บนพื้นผิวและปนเปื้อนตัวอย่างการควบคุมคุณภาพ เนื่องจากกรดนิวคลีอิกในสิ่งแวดล้อมและกรดนิวคลีอิกของผลิตภัณฑ์ไม่สามารถแยกแยะได้ในการทดสอบการควบคุมคุณภาพ qPCR และ NGS จะส่งสัญญาณถึงความกังวลด้านความปลอดภัย ซึ่งนําไปสู่การปฏิเสธชุดผลิตภัณฑ์โดยไม่จําเป็นและความล่าช้าในการรักษาผู้ป่วย

2. การปนเปื้อนข้ามระหว่างผลิตภัณฑ์

กรดนิวคลีอิกของผลิตภัณฑ์ CAR-T ของผู้ป่วยอาจยังคงอยู่บนพื้นผิวของอุปกรณ์ที่ใช้ในการผลิต CAR-T และถูกถ่ายโอนไปยังผลิตภัณฑ์ CAR-T ของผู้ป่วยรายอื่น เนื่องจากนี่เป็นความเสี่ยงสําหรับการบําบัดด้วยระบบอัตโนมัติ จึงเป็นที่ยอมรับไม่ได้

3. การทดสอบการควบคุมคุณภาพของความแรงได้รับผลกระทบ

การทดสอบประสิทธิภาพของผลิตภัณฑ์ CAR-T จําเป็นต้องมีการวัดระดับการแสดงออกของ CAR และกิจกรรมการทํางานของเซลล์ CAR-T กรดนิวคลีอิกที่มีอยู่ในสิ่งแวดล้อมอาจรบกวนการทดสอบความแรงที่วัดกิจกรรมการทํางานของเซลล์ CAR-T ผ่านกระบวนการถ่ายโอน สิ่งนี้นําไปสู่การประเมินประสิทธิภาพของผลิตภัณฑ์ที่ไม่ถูกต้องซึ่งอาจต่ํากว่าหรือสูงกว่าระดับจริง

ขอแนะนํา Nucleic Acid Scavenger

สารทําความสะอาดที่ใช้แบบดั้งเดิม เช่น เอทานอลหรือสารฟอกขาวเจือจางไม่ทําลายกรดนิวคลีอิก การย่อยสลายทางเคมีของ DNA และ RNA ที่ดําเนินการโดยเทคโนโลยี Nucleic Acid Scavenger เติมเต็มช่องว่างนี้

1. กลไกการออกฤทธิ์

• สลาย >99% ของ RNA / DNA ที่ติดอยู่บนพื้นผิวผ่านการไฮโดรไลซิสทางเคมีอย่างรวดเร็ว

• ส่วนประกอบจะไม่ทําปฏิกิริยากับเมมเบรนซิลิกาหรือลูกปัดแม่เหล็กที่ใช้ในการสกัดกรดนิวคลีอิก

• จะไม่ส่งผลเสียต่อประสิทธิภาพการสกัดหรือคุณภาพของกรดนิวคลีอิกที่แยกได้

• ตรวจสอบความถูกต้องและความน่าเชื่อถือของผลลัพธ์จากการตรวจหากรดนิวคลีอิกของไวรัสในภายหลัง

2. ประโยชน์สําหรับการผลิต CAR-T

•อเนกประสงค์: สามารถใช้กับโต๊ะทดลองตู้ความปลอดภัยทางชีวภาพพลาสติกโฟมและแม้แต่บรรจุภัณฑ์กล่องและกล่อง

•สะดวก: ไม่จําเป็นต้องเปลี่ยนความเข้มข้นสเปรย์การใช้ชั้นที่สม่ําเสมอกับพื้นผิว

•ปลอดภัย: ไม่มีมาตรการป้องกันพิเศษถุงมือมาตรฐานหน้ากากและแว่นตาเพียงพอ

• ง่าย: ไม่จําเป็นต้องมีมาตรการควบคุมการจัดเก็บและการจัดการพิเศษ

เทคโนโลยี Longlight - พันธมิตรที่เชื่อถือได้ของคุณในการผลิตเซลล์บําบัด

Longlight Technology เป็นซัพพลายเออร์ที่เชื่อถือได้ด้านเทคโนโลยีชีวภาพและโซลูชั่นในห้องปฏิบัติการ ซึ่งก่อตั้งขึ้นในปี 2015 โดยทีมอาจารย์มหาวิทยาลัยและผู้เชี่ยวชาญด้านเทคนิคที่มีประสบการณ์มากมายในตลาดเทคโนโลยีชีวภาพ

ความเชี่ยวชาญของบริษัท:

•เป็นคนแรกที่เปิดตัวระบบตัวอย่างอัลตราโซนิกที่มุ่งเน้นของจีนและระบบ degassing สูญญากาศของไหลเป็นครั้งแรกของโลก

• มุ่งเน้นไปที่การวินิจฉัยระดับโมเลกุลและชีววิทยาระดับโมเลกุลตั้งแต่ก่อตั้ง

• การวิจัยและออกแบบอุปกรณ์ห้องปฏิบัติการชีวภาพระดับโลก

กลุ่มผลิตภัณฑ์ CAR-T QC ที่เกี่ยวข้อง:

• Nucleic Acid Scavenger (มี 500 มล. 1 ลิตร 2 ลิตร และ 5 ลิตร)

• เจลอะกาโรสสําเร็จรูป หลอดคิวบิต การสกัดกรดนิวคลีอิก และชุดเตรียมห้องสมุด

•เครื่องแยกแม่เหล็กทําให้บริสุทธิ์ด้วยกรดนิวคลีอิกการออกแบบสนามสม่ําเสมอ

คุณภาพและความน่าเชื่อถือ:

• เสถียรภาพ 1 ปีที่เก็บที่อุณหภูมิห้อง

•ผ่านการตรวจสอบสําหรับใช้กับโต๊ะทํางานฟิล์มพลาสติกกล่องและกล่องโฟม

• เพื่อการวิจัยและทดลองเท่านั้น ไม่ใช่สําหรับการวินิจฉัยทางคลินิก

• การปรากฏตัวทั่วโลก: Longlight เข้าร่วมงาน Medlab Asia & Asia Health 2024 ที่กรุงเทพฯ ประเทศไทย เพื่อให้บริการชุมชนชีวการแพทย์ทั่วโลก

การรวม Nucleic Acid Scavenger ในการผลิต CAR-T

สิ่งที่คาดหวังในไซต์การผลิต CAR-T:

1. การปนเปื้อนรายวัน:

• ทุกพื้นผิวในตู้ความปลอดภัยทางชีวภาพก่อนและหลังการผ่าตัดแต่ละครั้ง

•พื้นผิวของอุปกรณ์ (เครื่องหมุนเหวี่ยงตู้อบเครื่องแยกแม่เหล็ก ฯลฯ )

•ตู้คอนเทนเนอร์ขนส่งสําหรับตัวกลางและผลิตภัณฑ์ขั้นสุดท้าย

2.In กรณีของการดําเนินการหลายครั้ง จําเป็นต้องมีการปนเปื้อนสําหรับ:

• การจัดการพื้นผิวสําหรับอุปกรณ์ที่สัมผัสกับผลิตภัณฑ์ของผู้ป่วยที่แตกต่างกัน

• พื้นผิวของอุปกรณ์จัดเก็บ (ตู้เย็น ตู้แช่แข็ง ตู้คอนเทนเนอร์ ฯลฯ)

3. ห้องปฏิบัติการควบคุมคุณภาพ:

• พื้นผิวที่เตรียม PCR และการจัดลําดับ

• การปนเปื้อนในพื้นที่ทํางานของการสกัดกรดนิวคลีอิก

4. การตรวจสอบความถูกต้อง:

• ก่อนและหลังใช้ Nucleic Acid Scavenger ให้เช็ดพื้นผิว

• การกําจัดกรดนิวคลีอิก >99% จะต้องได้รับการยืนยันโดย qPCR

• ผลลัพธ์จะพร้อมสําหรับการตรวจสอบที่จะเกิดขึ้น

สรุป: พื้นฐานการผลิตเซลล์บําบัดสมัยใหม่

การพัฒนาอย่างรวดเร็วของการบําบัดด้วย CAR-T ส่งผลให้มีการบําบัด 12 แบบที่ได้รับการอนุมัติทั่วโลกภายในปี 2024 เมื่อการบําบัดแบบผู้ป่วยพัฒนาไปสู่การบําบัดแบบสําเร็จรูปความกังวลเรื่องการปนเปื้อนจะชัดเจนมากขึ้น

สิ่งนี้จะสมเหตุสมผลมากขึ้นเนื่องจาก:

• กรดนิวคลีอิกในสิ่งแวดล้อมเป็นภัยคุกคามต่อความปลอดภัยและคุณภาพของผลิตภัณฑ์ขั้นสุดท้าย

• หน่วยงานกํากับดูแลกําลังเพิ่มมาตรฐานสําหรับการควบคุมการปนเปื้อน

• การศึกษาในปี 2024 โดย Mahati et al. เกี่ยวกับไมโครพลาสติกเน้นย้ําว่าสารปนเปื้อนในสิ่งแวดล้อมส่งผลต่อการทํางานของ CAR-T อย่างไร

• Nucleic Acid Scavenger เป็นโซลูชันที่ผ่านการตรวจสอบและใช้งานง่ายสําหรับความเสี่ยงเฉพาะนี้

สําหรับผู้ผลิต CAR-T การใช้ Nucleic Acid Scavenger ในกลยุทธ์การควบคุมการปนเปื้อนแสดงถึงการลงทุนเชิงรุกในด้านคุณภาพของผลิตภัณฑ์ การปฏิบัติตามกฎระเบียบ และผลลัพธ์ของผู้ป่วยในท้ายที่สุด ในขณะที่อุตสาหกรรมก้าวไปสู่การบําบัดด้วยเซลล์ที่แก้ไขยีนที่ซับซ้อนมากขึ้นหลักการพื้นฐานยังคงไม่เปลี่ยนแปลง: สภาพแวดล้อมการผลิตที่สะอาดทําให้เกิดการบําบัดที่ปลอดภัยและมีประสิทธิภาพ

ซีทีเอ

สําหรับข้อมูลเพิ่มเติมเกี่ยวกับ Nucleic Acid Scavenger ของ Longlight Technology และโซลูชันจีโนมอื่น ๆ รวมถึงระบบอัลตราโซนิกที่โฟกัสเครื่องแยกแม่เหล็กและวัสดุสิ้นเปลืองในห้องปฏิบัติการโปรดติดต่อทีมงานของเราเพื่อขอใบเสนอราคาฟรี

คําถามที่พบบ่อย

ไตรมาสที่ 1 Nucleic Acid Scavenger ปลอดภัยสําหรับพื้นผิวกระจกตู้ความปลอดภัยทางชีวภาพหรือไม่?

แน่นอน. ปลอดภัยสําหรับกระจก สแตนเลส พลาสติก และพื้นผิวเคลือบ เพียงแค่พ่นหมอกเบา ๆ และปล่อยให้อากาศแห้ง

ไตรมาสที่ 2 สารตกค้างจะมีผลต่อความมีชีวิตของเซลล์ CAR-T อย่างไร?

ไม่มีผลกระทบอย่างแท้จริง รีเอเจนต์ไม่เป็นพิษต่อเซลล์และไม่ยับยั้งการเจริญเติบโตของการเพาะเลี้ยงเซลล์

ไตรมาสที่ 3 ดังนั้นมันจึงไม่จําเป็นต้องตัดเอทานอลและสารฟอกขาวออกจากการปฏิบัติประจําวันของเราหรือไม่?

ไม่ ควรใช้สําหรับการกําจัดกรดนิวคลีอิกเท่านั้นและไม่ใช้แทนน้ํายาฆ่าเชื้อแบคทีเรียและไวรัส

ไตรมาสที่ 4 ฉันควรใช้ในโรงงาน CAR-T GMP บ่อยแค่ไหน?

ก่อนและหลังแต่ละชุดบนพื้นผิวการทํางาน บวกระหว่างล็อตผู้ป่วยบนอุปกรณ์ที่ใช้ร่วมกัน

ไตรมาสที่ 5 ฉันต้องเช็ดหลังฉีดพ่นหรือไม่?

ไม่จําเป็น การปล่อยให้สารละลายผึ่งลมให้แห้งจะช่วยเพิ่มการเสื่อมสภาพสูงสุด การเช็ดอาจแพร่กระจายกรดนิวคลีอิกที่ไม่ย่อยสลาย